Milieux de culture

Gélose de Bismuth au sulfite Difco ™

La gélose Bismuth  au sulfite est un milieu hautement sélectif utilisé pour isoler Salmonella spp., en particulier Salmonella Typhi, dans les
échantillons alimentaires et cliniques.

C'est un supplément lyophilisé composé d'un antibiotique, la Novobiocine de qualité microbiologique nécessaire à la fabrication de milieu séléctif du genre Salmonella utilisé notament dans la fabrication de la gélose Rappaport-Vassiliadis semi-solide modifié M.R.S.V (550.610018.54)

La gélose CLED (Cystine Lactose Electrolyte Deficient) est utilisée pour l'isolement, la numération et la différenciation des microorganismes urinaires.

PREPARATION

Mettre en suspension 36,1 g de milieu déshydraté (BK020) dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
- Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution.
- Répartir en tubes ou en flacons.
- Stériliser à l’autoclave à 115°C pendant 20 minutes.

COMPOSITION

Pour 1 litre de milieu

- Peptone pancréatique de gélatine : 4,0 g
- Tryptone : 4,0 g
- Extrait de viande : 3,0 g
- L-cystine : 128,0 mg
- Lactose : 10,0 g
- Bleu de bromothymol : 20,0 mg
- Agar agar bactériologique : 15,0 g

pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25°C : 7,3 ± 0,2. 

Supplément sélectif chloramphénicol pour la détection et dénombrement des levures et moisissures.

Le supplément sélectif Chloramphénicol 50 mg, présenté sous forme lyophilisée, inhibe le développement de la plupart des contaminants bactériens, favorisant ainsi l’isolement et le dénombrement des levures et des moisissures.
Le supplément peut aussi être ajouté à la gélose Sabouraud (BK025) pour l’obtention de la gélose glucosée au chloramphénicol, existant en format déshydraté complet (BK007).

Préparation:

- Reprendre le lyophilisat en y ajoutant aseptiquement 3 mL d’eau distillée stérile, puis 2 mL d’acétone ou bien 5 mL d'une solution 1:1 éthanol / eau distillée stérile.
- Agiter le flacon plusieurs fois de façon à assurer une complète dissolution, tout en évitant la formation de mousse.
- Ajouter stérilement 1 mL de supplément sélectif à 110 mL de gélose glucosée à l'oxytétracycline OGA base (BK053) maintenue à 44-47°C ou à 100 mL de gélose de Sabouraud (BK025).
- Homogénéiser parfaitement.

Composition:

Chloramphénicol : 50,0 mg

Pour l'isolement et la différenciation des agents pathogènes des voies urinaires.

99,3% de Sensibilité pour E.coli.
L'objectif maljeur de ce milieu est la détection des agents pathogènes des voies urinaires comme E.coli (colonies rouges), Klebsiella (colonies bleues métalliques), P.mirabilis (colonies brunes avec halo), etc.
Toutefois CHROMagar™ Orientation a une application plus large en tant que gélose nutritive pour l'isolement des différents micro-organismes. Par exemple, CHROMagar™ Orientation peut être utilisé pour différencier les divers micro-organismes dans d'autres zones infectées, par exemple dans les cicatrices. 
CHROMagar™ Orientation est aussi utile lorsqu'il est complété par divers antibiotiques dans la détection des micro-organismes multi-résistants. 

Lecture :

• E.coli
  • Rose foncé à rougeâtre
• Klebsiella, Enterobacter, Serratia
  • Bleu métallique
• Citrobacter
  • Bleu métallique avec un halo rouge
• Proteus
  • Halo brun
• S.aureus
  • Doré, opaque, petit
• S.saprophyticus
  • Rose, opaque, petit
• Enterococcus
  • Bleu turquoise

Difco™ Pseudomonas Agar F

Pseudomonas Agar F, aussi connu sous le nom de Flo Agar, est utilisé pour l'amélioration de production de fluorescine.

Composition (pour 1L de préparation):

Digestat pancréatique de caséine ....................................... 10.0 g

Peptone protéique n°3............................................. 10.0 g

Phosphate dipotassique............................................... 1.5 g

Sulfate de magnésium ..................................................... 1.5 g

Agar ......................................................................... 15.0 g

POMME DE TERRE GLUCOSE GELOSE MERCK 10130-500G

Gélose glucosée de pomme de terre pour l’isolement, la culture et le dénombrement des Levures et Moisissures notamment dans les produits alimentaires.

Complément : acide tartrique à 10%.

Préparation :
Dissoudre 39 g/l. Autoclaver 20 minutes à 115 °C. Au moment de l’emploi ajouter 10 ml d’acide tartrique à 10% pour amener le pH à 3,5.

Composition :
Extrait de pomme de terre : 4,0
Glucose : 20,0
Agar agar : 15,0
pH final 5,6 ± 0,2

C'est un supplément lyophilisé concentré de Tergitol nécessaire pour la fabrication du milieu TTC+Tergitol (réf 550.610184.54)

le milieu complet est utilisé dans l'isolement et le dénombrement de Escherichia coli et des coliformes dans l'eau par technique de filtration sur membrane recommandé par ISO 9308-1 .

COMPOSITION:

0,2g Tergitol/ flacon

La solution TTC 1% Difco™ (Triphenyltetrazolium Chloride) est prête à l’emploi pour la préparation de milieu de culture.

La solution TTC 1% est préparée à partir de 2,3,5 triphenyltetrazolium chloride destinée à la microbiologie. Elle est utilisée comme un indicateur redox dans les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Chapman a expliqué que l’ajout de TTC à la gélose Tergitol™ permettait la détection et la confirmation de E. coli après seulement 10 heures d’incubation. Chapman a aussi expliqué que la gélose Tergitol 7 avec ajout de TTC donnait un milieu sélectif pour la détection et l’isolement de Candida albicans. Chapman ajoutait du TTC, Tergitol 7 et du pourpre de bromocrésol à la gélose Sabouraud au Malt pour l’isolement et l’identification de C. calbicans et autre champignon. Pagao, Levin et Trejo incorporaient du TTC dans la base Pagano Levin pour la détection et l’isolement des espèces de Candida.

Slanetz et Bartley utilisaient le TTC dans la gélose m-Enterococcus pour l’énumération des entérocoques. Sur ce milieu les colonies apparaissent de couleur rose à marron foncé. Kenner, Clark et Kabler utilisaient le TTC avec la gélose KF Streptococcus et le bouillon pour détecter et énumérer les streptocoques à la surface de l’eau.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La solution TTC 1% est utilisée comme un indicateur redox pour les milieux de culture pour la différenciation bactérienne. Elle est incolore dans sa forme oxydée et est réduite en triphénylformazan par des systèmes réducteurs. La formation du formazan est une réaction irréversible. Une fois que le microorganisme réduit l’indicateur, la couleur rouge persiste.

Supplément de sulfaméthazine

Un supplément lyophilisé à utiliser avec la base de gélose Baird Parker pour l'isolement et dénombrement de Staphylococcus aureus dans les denrées alimentaires et les aliments pour animaux conformément à la norme ISO 6888.

Tubes pour 500 ml de milieu.