Milieux de culture

Le supplément selectif sous forme liquide pour milieu la selectif des Salmonelles . Il est utilisé dans la complémentation du milieu IRIS Compass salmonella Agar (770.007008.00).

IRIS Salmonella® est certifiée NF VALIDATION, selon le protocole de validation NF EN ISO 16140-2 de 2016 pour tous produits d’alimentation humaine et animale, ainsi que les échantillons de l’environnement de production industrielle.

Composition en gramme par litre

- Système séléctif: 2.0g

- Colorant 0.1g

LETHEEN BOUILLON MODIFIE BD 263010-500G

Le bouillon Letheen  modifié est principalement utilisé pour les tests microbiologiques des cosmétiques.

Les apports du bouillon Letheen modifié:
- Les peptones apportent la source de carbone et d'azote pour la croissance d'un grande varièté debactéries et de champignons
-  La teneur en peptone a été augmentée dans les formules modifiées de Letheen
-  Le chlorure de sodium fournit un environnement osmotique approprié
- Le polysorbate 80, de la lécithine et du bisulfite de sodium neutralisent partiellement les systèmes de conservation que l'on trouve couramment dans les cosmétiques.

Composition du bouillon letheen modifié :
- Bouillon Letheen : 25,7g
- Tryptone : 5,0g
- Peptone proteose n°3 : 10,0g
- Extrait de levure : 2,0g
- Sodium bisulfite : 0,1g

C'est un complément liquide nécessaire pour la fabrication du milieu XLT 4 (Xylose, lactose, Tergitol 4™)

Le milieu complet est un milieu favorisant la culture des salmonelles avec un faible pouvoir séléctif. (limite la croissance des colonies faussement Gram positif.)

PRÉPARATION :

Prélevé et ajouter 4,6mL du flacon dans 1000mL de milieu XLT 4 base gélosé (ref: 550.100008.14) préalablement stérilisé.

Lactose bouillon solide, 500 gr.

Germes recherchés :

• Coliformes
• Salmonelles
• Etude de la fermentation du lactose des bactéries

Le Tergitol 7 agar  est utilisé pour la recherche et le dénombrement des Coliformes sur membrane.
milieu de base: TTC TERGITOL 7 ref: 250.033981.54
Préparation :
Dissoudre 51,10 g/l
Autoclaver 15 minutes à 115 °C
Après refroidissement à 45/50 °C, ajouter :
1 ml/100 ml d’une solution stérile de TTC à 0,05%
 

Composition en g/L.
Peptone de viande : 10,0
Extrait de levure : 6,0
Extrait de viande : 5,0
Lactose : 20,0
Bleu de bromothymol : 0,05
Tergitol 7 : 0,1
Agar agar : 12,7
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

Ensemencement :
Ensemencer par étalement en surface ou en disposant une membrane
Incuber pendant 21 h ± 3 heures à 36 °C ± 2 °C

Plate Count Agar (PCA)

La gélose pour dénombrement sur plaque est un milieu utilisé pour la détermination du contenu microbien total des aliments et aliments pour animaux, animaux, eau et autres matériaux.

Ce milieu, également connu sous le nom de Tryptone Glucose Yeast Agar ou Casein-Peptone Dextrose Yeast Agar. Il est conforme  aux spécifications données par l'American Public Health Association et ISO 4833.

Tetrathionate brilliant green bile enrichissement est un bouillon pour l’enrichissement des Entérobactériacées des denrées alimentaires.

Dissoudre 63 g/l sans chauffer à plus de 50 °C. Ne pas autoclaver. Incuber 18 à 24 h à 37 °C.

Composition :
Peptone de viande : 8,6
Bile de boeuf désséchée : 8,0
Chlorure de sodium : 6,4
Carbonate de calcium : 20,0
Tétrathionate de potassium : 20,0
Vert brillant : 0,07
pH final 7,0 ± 0,1

CHROMOCULT TBX GELOSE MERCK 16122-500G

Le TBX Agar est utilisé pour la recherche et le dénombrement des Escherichia coli ß-glucuronidase positive qui apparaissent sous forme de colonies bleues. (Selon normes NF V08-031).

Préparation :
Après dissolution de la poudre dans l'eau déminéralisée, autoclaver 15 minutes à 121 °C.

Ensemencement :
Transférer 1 ml d'échantillon, dilué ou non, dans une boîte de Pétri et y ajouter 15 ml de milieu TBX agar. Mélanger soigneusement.
Incubation à 44 °C pendant 18 à 24 h.

Composition :
Digestat enzymatique caséine : 20,0
Sels biliaires n°3 : 1,5
BCIG : 144 μmol
DMSO : 3 ml
Agar agar : 9 à 18 g
pH final 7,2 ± 0,2 à 25 °C

La base bouillon Fraser est utilisée avec le supplément pour bouillon Fraser dans l’enrichissement sélectif et la détection de Listeria.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

Les peptones, les extraits de bœuf et de levure fournissent l’azote, les vitamines et les minéraux. Le phosphate de sodium et le phosphate de potassium sont les agents tampon. La différenciation est facilitée par l’inclusion du citrate d’ammonium dans le milieu final. Comme toutes les espèces de Listeria hydrolysent l’esculine, l’ajout d’ions ferriques au milieu détectera la réaction. Un noircissement du milieu par les cultures contenant des bactéries est le résultat de la formation de 6,7-dihydroxycoumarine qui réagit avec les ions ferriques.

La sélectivité est assurée par la présence de chlorure de lithium, d’acide nalidixique et d’acriflavine dans la formule. La haute tolérance au sel de Listeria est utilisée comme moyen pour inhiber la croissance des entérocoques.

La base de milieu Oxford est utilisée pour préparer le milieu Oxford ou le milieu Oxford modifié pour isoler et différencier Listeria monocytogenes