Milieux de culture

La gélose TBX est un milieu chromogène sélectif utilisé pour l'isolement et l'identification d'Escherichia coli dans les aliments, conformément aux normes ISO 16649-1, -2 et -3.

PRINCIPE DE LA MÉTHODE
La digestion enzymatique de la caséine fournit des acides aminés, de l'azote, du carbone, des vitamines et des minéraux pour la croissance des organismes.
Les sels biliaires agissent comme agent sélectif inhibant la plupart des bactéries Gram-positives.
Le 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-glucuronide (BCIG) est le substrat chromogène clivé par l'enzyme β-glucuronidase d'E. coli. L'agar est l'agent de solidification.

Baird Parker Agar

Le bouillon Lactose Sulfite (LS) est un milieu utilisé pour la confirmation de Clostridium perfringens dans les aliments et produits pharmaceutiques.

Ce milieu est conforme aux recommandations de la Pharmacopée Européenne (EP) et de l'ISO 7937.

Une ampoule permet de supplémenter 1 l de Listeria bouillon enrichissement UVM 1 Merck 10824 afin d’obtenir le Listeria bouillon enrichissement UVM 2.
Au préalable l'ampoule est à diluer dans 10 ml d'eau stérile.

Acriflavine HCI : 0,013

L'Extrait de boeuf est un extrait déshydraté de tissu bovin utilisé pour préparer des milieux de culture microbiologique. 

L'extrait de boeuf est généralement utilisé à une concentration de 0,3 % dans les milieux de culture. 
L'extrait de boeuf est utilisé dans la composition des milieux de culture déshydratés et doit être dissous dans de l'eau distillée ou déionisée et
la stérilisation par autoclave. 

Bouillon RCM de Hirsch Grinsted BIOKAR – 500G

Le bouillon RCM (Reinforced Clostridial Medium) est un milieu non sélectif utilisé pour rechercher les clostridies dans le cadre du contrôle microbiologique des produits non stériles suivant les chapitres harmonisés des Pharmacopées. Il peut être utilisé pour la culture et le dénombrement des spores de Clostridium totaux gazogènes dans les produits laitiers, les conserves, les semi-conserves et les autres produits alimentaires.

Composition : 
Pour 1L de milieu

Tryptone : 10,0 g
Extrait de viande : 10,0 g
Extrait autolytique de levure : 3,0 g
Cystéine (chlorhydrate) : 0,5 g
Glucose : 5,0 g
Amidon soluble : 1,0 g
Chlorure de sodium : 5,0 g
Acétate de sodium : 3,0 g
Agar agar bactériologique : 0,5 g
pH final à 25°C : 6,8 ± 0,2

Préparation :

1. Mettre en suspension 38,0 gde milieu déshydraté dans 1 litre d’eau distillée ou déminéralisée.
2. Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir durant le temps nécessaire à sa dissolution complète.
3. Répartir à chaud en tubes à raison de 10 mL par tube.
4. Stériliser à l’autoclave à 121 °C pendant 15 minutes.
5. Refroidir à température ambiante.

S’il a été préparé à l’avance, régénérer le milieu par un chauffage de 20 minutes à 100 °C puis refroidir à température ambiante.

La gélose au Rouge de phénol et au Mannitol permet de mettre en évidence les bactéries basées sur des réactions de fermentation du mannitol.

L'avantage d'un milieu de fermentation solide est qu'il permet d'observer la fermentation du mannitol en conditions aérobies et anaérobies.

Composition pour une préparation de 1 Litre :
Protease Peptone : 10 g
Extrait de boeuf : 1 g
D-Mannitol : 10 g
Chlorure de Sodium : 5 g
Agar : 15 g
Rouge de phénol : 25 mg

Le peptone fournit le carbone et l'azote nécessaires à une bonne la croissance d'une grande variété d'organismes.
Chlorure de sodium maintient l'équilibre osmotique du milieu.
L'agar est l'agent solidifiant.
Le rouge de phénol est l'indicateur de pH, en virant de rouge-orange à jaune lorsque de l'acide est produit pendant la fermentation.
Le milieu reste rouge ou devient alcalin (rouge plus foncé).

BOUILLON DEXTROSE SABOURAUD

Le bouillon de dextrose de Sabouraud (SDB) est un milieu liquide Le bouillon de dextrose de Sabouraud (SDB) est un milieu liquide recommandé pour une utilisation dans les procédures qualitatives pour l'isolement de levures et de moisissures et pour la culture ou la sous-culture de champignons à partir d'échantillons cliniques et non cliniques spécimens.
Ce milieu est conforme aux exigences de la méthode harmonisée de la pharmacopée des États-Unis
(USP), la Pharmacopée Européenne (EP) et la Pharmacopée Japonaise (JP) pour l'examen microbiologique des
produits non stériles.

Supplément Listeria Chromocult® Merck - 10 vials

Le supplément d'enrichissement pour gélose Chromocult® Listeria est une suspension homogène et stérile de L-α-phosphatidylinositol dans de l'eau distillée.

Mode d'action

La différenciation de Listeria monocytogenes des autres Listeria spp. est obtenu grâce à la production d'une phospholipase C spécifique du phosphatidylinositol (PI-PLC). Listeria monocytogenes hydrolyse le substrat purifié spécifique ajouté au milieu produisant un halo opaque autour des colonies. La plupart des Listeria ivanovii produisent également un halo opaque autour des colonies après 48 h d'incubation.

Préparation

1. Une bouteille du supplément d'enrichissement stérile est chauffée dans un bain-marie à 48-50 °C.
2. Juste après l'ajout du supplément sélectif Chromocult® Listeria (4 ml), ajoutez tout le contenu du flacon de supplément d'enrichissement Chromocult® Listeria (20 ml) de manière aseptique à 480 mL de gélose sélective Chromocult® Listeria fondue refroidie à 45-50 °C.
3. Remuez doucement pendant cet ajout pour une répartition homogène des deux suppléments.

Normes : ISO 11290 et EN ISO 11133.