Milieux de culture Déshydratés

Le bouillon Fraser base est un bouillon de pré-enrichissement et d’enrichissement pour la recherche de Listeria dans les produits alimentaires.

Préparation du bouillon Fraser base Merck 10938 :
Dissoudre 57,4 g par litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.
- pour le Fraser au demi : à 1 litre de bouillon base, refroidi à 50 °C, ajouter 2 flacons de mélange d'antibiotiques et 2 autres de citrate de fer ammoniacal.
- pour le Fraser complet : à 1 litre de bouillon base, ajouter 4 flacons de mélange d'antibiotiques et 2 autres de citrate de fer ammoniacal.

Composition du bouillon Fraser base :
Protéose peptone : 5,0
Tryptone : 5,0
Extrait de viande : 5,0
Extrait de levure : 5,0
Chlorure de sodium : 20,0
Hydrogénophosphate disodique 10 H₂O : 12,0
Dihydrogénophosphate de potassium : 1,35
Esculine : 1,0
Chlorure de lithium : 3,0
Contrôle du pH 7,2 ± 0,2 à 25 °C

Gélose MYP Difco™ 

La gélose MYP est utilisée avec un enrichissement de jaune d'oeuf 50% et un antimicrobien Supplément P pour dénombrer Bacillus cereus des aliments.

La gélose au fer Kligler est utilisée pour différencier les membres des entérobactéries sur la base de leur capacité à fermenter le dextrose et le lactose et à libérer des sulfures.

Cette peptone est fabriquée à partir d'une farine se soja délipidée et sécurisée en OGM par son statut "Identity Preserved". Elle se caractérise par un taux des acides aminés équilibrés et une quantité de sucres totaux qui permet la croissance rapide de beaucoup de microorganismes. Associée très souvent avec une peptone de caséine dans les milieux de culture bactériens. 

APPLICATIONS : C'est une peptone de choix dans les milieux de culture déshydratés comme dans le bouillon Caséine-soja. Fabriquée avec des caractéristiques physiques plus adaptés à un utilisation en diagnostics, la peptone favorise la croissance d'une large gamme de bactéries et se homogenise bien avec d'autres ingrédients. 

Le milieu Rappaport-Vassiliadis semi-solide (MSRV semi-solide) de Difco™ est utilisé avec le supplément antibiotique Novobiocine dans la détection rapide de Salmonella motile dans les fèces et les produits alimentaires.

Le milieu MSRV semi-solide est une modification du bouillon d’enrichissement Rappaport-Vassiliadis pour la détection des Salmonella motiles dans les fèces et les produits alimentaires. Le travail original sur le milieu MSRV montrait que le milieu semi-solide sur boite de pétri pouvait être utilisé comme un moyen rapide et sensible de l’isolement de Salmonella motile à parti de produits alimentaires à la suite d’un pré-enrichissement ou d’un enrichissement sélectif. Le milieu semi-solide permet la détection de la motilité par des halos de croissance autour du point d’origine de l’inoculation.

Le milieu MSRV semi-solide peut être utilisé comme milieu en boîte pour isoler Salmonella spp. (autre que Salmonella Typhi ou Salmonella Paratyphi A) à partir de prélèvement de selle avec une haute sensibilité et spécificité.

Bouillon d'enrichissement Listeria Difco ™

Le bouillon d'enrichissement Listeria est utilisé pour enrichir sélectivement Listeria des aliments.

La gélose Mueller Hinton II (Mueller Hinton II Agar) est utilisée dans la méthode standardisée de test par diffusion sur disque pour déterminer la sensibilité des isolats cliniques des organismes aérobies à croissance rapide vis-à-vis des agents antimicrobiens.

La méthode Bauer-Kirby consiste à diffuser au travers d’une gélose des substances antimicrobiennes imprégnées sur des disques de papier. Des méthodes plus anciennes, qui faisaient appel à des disques aux concentrations antimicrobiennes faibles et élevées, fondaient l’interprétation des résultats sur la présence ou l’absence de zones d’inhibition. Aujourd’hui, ce procédé s’appuie sur des disques à concentration constante d’agents antimicrobiens et les diamètres des zones sont comparés aux concentrations minimales d’inhibition (CMI). Dans le mode opératoire du test, une suspension standardisée de l’organisme est écouvillonnée sur toute la surface du milieu. Des disques de papier imprégnés d’une quantité déterminée d’antibiotique ou d’autres agents antimicrobiens sont alors placés contre la surface du milieu. La boîte de Pétri est incubée, puis les zones d’inhibition qui apparaissent autour de chaque disque sont mesurées. La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S), intermédiaire (I) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux 2A à 2D figurant dans le document CLSI M100 (M2). La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux des concentrations critiques fixées par l'EUCAST. Divers facteurs ont été identifiés comme influençant les tests de sensibilité par diffusion sur disque. Ce sont notamment le milieu et l’excès d’humidité à sa surface, la profondeur de la gélose, l’activité des disques, la concentration de l’inoculum, le pH et la production de ß-lactamase par les microorganismes testés.

La Mueller Hinton Agar est un milieu standard utilisé lors des tests de sensibilité des aérobies à croissance rapide ou des organismes bactériens anaérobies facultatifs, par exemple les staphylocoques, les entérocoques, la famille des Enterobacteriaceae et les bâtonnets aérobies Gram-négatifs (ex. les espèces de Pseudomonas). Les documents de référence pour l'interprétation de la sensibilité sont mis à jour tous les ans. La version la plus récente doit être consultée afin d'interpréter correctement les résultats obtenus. Diverses méthodes ainsi que d'autres milieux et conditions ont été développés pour les espèces exigeantes, par exemple les espèces Haemophilus spp., Neisseria spp. et Streptococcus pneumoniae et les streptocoques.

Trypticase™ Soy Agar (TSA) ou gélose trypticase au soja est utilisée pour l'isolement et la culture de microorganismes exigeants ou non. 

Pour l'isolement et la détection de Pseudomonas spp.

P.aeruginosa est un indicateur valable pour le contrôle de l'efficacité des traitements de désinfection de l'eau. Ce paramètre est actuellement utilisé comme critère dans la régulation des pataugeoires et piscines. En plus de son rôle d'indicateur de propreté, P aeruginosa est également recherché comme pathogène opportuniste dont la transmission est souvent associée à l'eau.
CHROMagar™ Pseudomonas fournit des résultats rapides et clairs pour la détection de Pseudomonas grâce à des couleurs de colonies différentielles. 

Lecture :

• Pseudomonas dont P.aeruginosa
  • Bleu-vert
• Autres microorganismes tels que S.saprophyticus, E.coli, P.mirabilis
  • Sans couleur ou inhibé

La gélose à l'urée et le bouillon de test à l'uréase sont utilisés pour la différenciation des organismes, en particulier les entérobactéries, sur la base de la production d'uréase.