Milieux de culture Déshydratés

Gélose TSAYE, un milieu universel convenant pour un large éventail d’emplois. Il est essentiellement utilisé pour l’isolement et la purification des micro-organismes dont les colonies sont obtenues sur les milieux d’isolement sélectif (Palcam, Oxford, Listeria Chromagar…) destinés à la recherche ou à la numération des Listeria en particulier des Listeria monocytogenes.

Composition :

Tryptone : 17,0
Peptone papaïnique de soja : 3,0
Extrait autolytique de levure : 6,0
Glucose : 2,5
Phosphate dipotassique : 2,5
Chlorure de sodium : 5,0
Agar : 11,0
pH final 7,3 ± 0,2 à 25 °C

TSN Agar (Trypticase™ Sulfite Neomycin, ou gélose TSN) est utilisée pour l’isolation sélective de Clostridium perfringens.

La gélose TSN a été développée par Marshall et al. comme un milieu qui aboutit rapidement à l’énumération de Clostridium perfringens. La formulation est une modification du milieu Mossel pour l’énumération des clostridies sulfitoréductrices dans les aliments. La température d’incubation de 46°C de la gélose TSN permet d'obtenir des résultats spécifiques et quantitatifs.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE

La néomycine et la polymyxine sont des inhibiteurs pour les entérobacilles Gram-négatives. La néomycine à la concentration utilisée inhibe partiellement C. bifermentans. L’incubation à haute température 46°C rend le milieu hautement spécifique de C. perfringens. Les colonies sont noires en raison de la formation de sulfure ferrique suite à la réduction du sulfite.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : base de gélose MacConkey

Bouillon d'infision de coeur Bacto™

Le bouillon d'infision de coeur (HIB) est un usage général non sélectif.
Milieu utilisé pour l'isolement des aliments exigeants sur le plan nutritionnel

Une gélose pour le dénombrement au lait écréme est utilisé pour la numération des germes dans le lait et les produits laitiers.

Préparation :
Dissoudre 20 g/l dans de l’eau déminaralisée. Chauffer au bain-marie tout en agitant fréquemment jusqu’à complète dissolution. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Composition :
Peptone de caséine : 5,0
Extrait de levure : 2,5
Glucose : 1,0
Lait écrèmé en poudre : 1,0
Agar agar : 10,5
pH final 7,1 ± 0,1 à 25 °C

Obtenue par hydrolyse pancréatique.

Le bouillon Azide Dextrose est utilisé pour la culture des streptocoques dans l'eau et les eaux usées.

Incuber les tubes inoculés à 35°C, à 24 ± 2h vérifier la turbidité du tube. Si aucune turbidité n'est évidente, réincuberet lire de nouveau à 48 ± 3 heures.

L'apparition d'une turbidité indique la présence de streptocoques.
 

Gélose APT Difco™ 

L'agar APT est utilisé pour cultiver des lactobacilles hétérofermentaires et d'autres organismes nécessitant une teneur élevée en thiamine. C'est aussi utilisé pour maintenir les cultures mères de Weissella (Lactobacillus) viridescens ATCC ™ 12706 utilisé dans le dosage de la thiamine.
 

RAPPAPORT VASSILIADIS MODIFIE SEMI-SOLIDE BASE BK134HA-500G

Principe du MSRV semi-solide :
L’efficacité bactériologique est fondée sur la capacité des Salmonelles à migrer de façon sélective dans le milieu. Les Salmonelles produisent un halo opaque, témoin de la culture.

Préparation :
Dissoudre 31,6 g/litre d’eau distillée ou déminéralisée. Porter à ébullition lentement en agitant jusqu’à dissolution complète. Maintenir l’ébullition 2 min. Ne pas autoclaver. Répartir stérilement en flacons de 100 ml. Refroidir à 48 °C. Ajouter le supplément sélectif novobiocine Merck 9874. Couler en boîtes de Pétri.

Mode d'emploi :
Ensemencer 3 gouttes (0,1 ml) de bouillon de pré-enrichissement ou d’enrichissement sélectif en trois spots séparés à la surface d’une même boîte de milieu. Incuber à 42 °C/20 à 24 h.

Lecture :
Les colonies blanchâtres au point d’innoculation, entourées d’un halo opaque confirment la présence de Salmonelles.

Composition :
Tryptone : 4,59
Hydrolysat acide de caséine : 4,59
NaCI : 7,34
Phosphate monopotassique : 1,47
Chlorure de magnésium anhydre : 10,93
Vert malachite (oxalate) : 0,037
Agar agar : 2,70
pH final : 5,2 ± 0,2 à 25 °C

Le TSB modifié bouillon à la novobiocine est un bouillon d’enrichissement recommandé pour la recherche d’E. coli. 0157 : H7 dans les produits alimentaires selon la norme NF V 08-032.

Préparation :
Dissoudre 33 g/litre d’eau déminéralisée. Autoclaver à 121 °C/15 min.

Inoculer le TSB bouillon modifié avec l’échantillon à tester (généralement 25 g de l’échantillon dans 225 ml de bouillon). Incuber à 41,5 °C/6 h puis 12 à 24 h.

Composition :
Peptone de caséine : 17,0
Peptone de farine de soja : 3,0
Chlorure de sodium : 5,0
Sels biliaires n° 3 : 1,5
D (+) glucose : 2,5
Di-potassium hydrogénophosphate : 4
Novobiocine : 0,02
pH final 7,3 ± 0,2 à 25 °C