Milieux de culture Déshydratés

La gélose Mueller Hinton II (Mueller Hinton II Agar) est utilisée dans la méthode standardisée de test par diffusion sur disque pour déterminer la sensibilité des isolats cliniques des organismes aérobies à croissance rapide vis-à-vis des agents antimicrobiens.

La méthode Bauer-Kirby consiste à diffuser au travers d’une gélose des substances antimicrobiennes imprégnées sur des disques de papier. Des méthodes plus anciennes, qui faisaient appel à des disques aux concentrations antimicrobiennes faibles et élevées, fondaient l’interprétation des résultats sur la présence ou l’absence de zones d’inhibition. Aujourd’hui, ce procédé s’appuie sur des disques à concentration constante d’agents antimicrobiens et les diamètres des zones sont comparés aux concentrations minimales d’inhibition (CMI). Dans le mode opératoire du test, une suspension standardisée de l’organisme est écouvillonnée sur toute la surface du milieu. Des disques de papier imprégnés d’une quantité déterminée d’antibiotique ou d’autres agents antimicrobiens sont alors placés contre la surface du milieu. La boîte de Pétri est incubée, puis les zones d’inhibition qui apparaissent autour de chaque disque sont mesurées. La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S), intermédiaire (I) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux 2A à 2D figurant dans le document CLSI M100 (M2). La réaction de l'organisme est déterminée comme sensible (S) ou résistante (R) à un agent en comparant les diamètres des zones observées à ceux répertoriés dans les tableaux des concentrations critiques fixées par l'EUCAST. Divers facteurs ont été identifiés comme influençant les tests de sensibilité par diffusion sur disque. Ce sont notamment le milieu et l’excès d’humidité à sa surface, la profondeur de la gélose, l’activité des disques, la concentration de l’inoculum, le pH et la production de ß-lactamase par les microorganismes testés.

La Mueller Hinton Agar est un milieu standard utilisé lors des tests de sensibilité des aérobies à croissance rapide ou des organismes bactériens anaérobies facultatifs, par exemple les staphylocoques, les entérocoques, la famille des Enterobacteriaceae et les bâtonnets aérobies Gram-négatifs (ex. les espèces de Pseudomonas). Les documents de référence pour l'interprétation de la sensibilité sont mis à jour tous les ans. La version la plus récente doit être consultée afin d'interpréter correctement les résultats obtenus. Diverses méthodes ainsi que d'autres milieux et conditions ont été développés pour les espèces exigeantes, par exemple les espèces Haemophilus spp., Neisseria spp. et Streptococcus pneumoniae et les streptocoques.

BD Gélose Difco™, technique

Utilisée dans la préparation de milieu de culture microbiologique. La gélose BD™ Difco™, technique est un agent solidifiant avec des paramètres de contrôle de qualité plus larges que d’autres géloses bactériologiques. Cependant, la solubilité, la température de gélification et la solidité sont soigneusement surveillées afin de permettre son utilisation.

La gélose Sabouraud dextrose (gélose glucosée de Sabouraud) est utilisée classiquement pour la croissance de levures et moisissures pathogènes ou non pathogènes dans l'alimentation, les produits cosmétiques et pharmaceutiques ainsi que dans le domaine clinique en vue d'une identification.

Le lait écrémé est utilisé pour la préparation de milieux de culture microbiologiques. Le milieu de lait écrémé peut être utilisé pour la culture et la différenciation de micro-organismes dans les aliments sur la base de la coagulation et de la protéolyse de la caséine.

Incuber les tubes avec des bouchons serrés pour les Clostridia et des bouchons desserrés pour les autres organismes, à 35° ± 2°C et lire à différents intervalles pendant 7 jours pour vérifier la croissance et les réactions.

Le milieu Antibiotique 19 est utilisé pour déterminer la puissance des antibiotiques sur divers souches bactériennes.

La gélose à l’éosine et au bleu de méthylène est un milieu différentiel légèrement sélectif servant à l’isolement et à la différenciation de bacilles entériques à Gram négatif (Enterobacteriaceae et divers autres bâtonnets Gram-négatifs).

La EMB agar contient des colorants tels que l’éosine Y et le bleu de méthylène qui inhibent les bactéries Gram-positives jusqu’à un certain point. Ces colorants servent aussi d’indicateurs différentiels par réaction à la fermentation du lactose et/ou du saccharose due aux microorganismes. Les coliformes produisent des colonies de couleur bleu-noir tandis que les colonies de Salmonella et de Shigella sont incolores ou de couleur ambrée transparente. Les colonies de Escherichia coli peuvent présenter un aspect caractéristique vert métallisé brillant dû à la fermentation rapide du lactose.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Base de gélose au sang Columbia, Hémolyse améliorée

Les géloses et bouillons PPLO (Mycoplasma), lorsqu'ils sont complétés par des enrichissements nutritifs, sont utilisés pour isoler et cultiver Mycoplasma.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Gélose entérique Hektoen

Difco™ Pseudomonas Agar F

Pseudomonas Agar F, aussi connu sous le nom de Flo Agar, est utilisé pour l'amélioration de production de fluorescine.

Composition (pour 1L de préparation):

Digestat pancréatique de caséine ....................................... 10.0 g

Peptone protéique n°3............................................. 10.0 g

Phosphate dipotassique............................................... 1.5 g

Sulfate de magnésium ..................................................... 1.5 g

Agar ......................................................................... 15.0 g