Milieux de culture Déshydratés

Le bouillon de base TAT (avec ajout de polysorbate 20) est utilisé pour cultiver les microorganismes à partir de matériaux très visqueux ou gélatineux. 

La base gélose Columbia, avec ou sans addition de 5% (ou 10%) de sang de mouton, est hautement nutritive, milieu d’usage général pour l’isolement et la culture de microorganismes fastidieux et non-fastidieux à partir d’une variété de matériels cliniques ou non.

La gélose Phenyléthyl alcool (PEA) est un millieu sélectif pour l’isolement des microorganismes Gram (+), particulièrement pour les coques Gram positif, à partir de spécimens de flore mixte Gram-positive et Gram-négative. 

La gélose Mitis Salivarius est utilisée avec la solution Tellurite 1% (416.215294.02) pour isoler Streptococcus mitis, S. salivarius (streptocoques non hémolytiques) et les entérocoques (streptocoques fécaux), en particulier à partir d'échantillons gravement contaminés.

S. mitis produit de petites ou minuscules colonies bleues. Ces colonies peuvent devenir plus faciles à distinguer avec une incubation plus longue.
S. salivarius produit des colonies bleues, lisses ou rugueuses, de 1 à 5 mm de diamètre selon le nombre de colonies sur la plaque.
Les espèces d'entérocoques forment des colonies bleu foncé ou noires, brillantes, légèrement surélevées, de 1 à 2 mm.

Difco™ Milieu antibiotique n°9 (Gélose à base de polymyxine)

Ce milieu est utilisé pour déterminer la puissance d'un antibiotique par la technique d'analyse microbiologique.

Composition (pour 1L de préparation):

Digestat de caséine pancréatique....................................... 17.0 g

Peptone de soja................................................................ 3.0 g

Dextrose ..................................................................... 2.5 g

Chlorure de sodium ......................................................... 5.0 g

Phosphate dipotassique............................................... 2.5 g

Agar ......................................................................... 20.0 g

La gélose Endo (Endo agar) est un milieu de culture différentiel légèrement sélectif pour la détection de coliformes et autres microorganismes entériques.

La sélectivité de la gélose Endo est due à la combinaison du sulfite de sodium et de la fuchsine basique, qui entraîne la suppression partielle des micro-organismes gram (+). Il est classé comme légèrement sélectif puisque d’autres milieux contiennent des inhibiteurs plus puissants pour les micro-organimes gram positifs.

Les coliformes fermentent le lactose, produisent des colonies rose foncé à rose-rouge présentant un aspect brillant et irisé vert métallisé avec coloration identique du milieu. Les colonies de micro-organismes qui ne fermentent pas le lactose sont incolores voir rose pâle et s’estompent sur le fond rose du milieu.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : Milieu ISP 2

Le bouillon Azide Dextrose est utilisé pour la culture des streptocoques dans l'eau et les eaux usées.

Incuber les tubes inoculés à 35°C, à 24 ± 2h vérifier la turbidité du tube. Si aucune turbidité n'est évidente, réincuberet lire de nouveau à 48 ± 3 heures.

L'apparition d'une turbidité indique la présence de streptocoques.
 

La gélose mannitol-sel (Mannitol Salt Agar) est utilisée pour l’isolement sélectif des staphylocoques et la détection des Staphylococcus aureus à partir d'échantillons cliniques.

PRINCIPE

La Mannitol Salt Agar est une préparation élaborée par Chapman pour différencier les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) des staphylocoques coagulase négatifs. Elle est utilisée pour isoler les staphylocoques provenant d’échantillons cliniques, de cosmétiques et pour les tests de dénombrement des microorganismes. Les peptones et l’extrait de bœuf présents dans la Mannitol Salt Agar apportent les éléments nutritifs essentiels. La concentration à 7,5 % du chlorure de sodium entraîne l’inhibition partielle ou complète des organismes bactériens autres que les staphylocoques. La fermentation du mannitol, signalée par un changement de l’indicateur au rouge de phénol, permet de différencier les espèces de staphylocoques. Les staphylocoques coagulase positifs (ex. Staphylococcus aureus) produisent des colonies de couleur jaune et une coloration jaune du milieu environnant, tandis que les staphylocoques coagulase négatifs produisent des colonies de couleur rouge et aucun changement de teinte de l’indicateur au rouge de phénol.

BD Milieu de culture déshydraté Difco™ : base de gélose MacConkey